Protein Phosphatase Protocols

Protein Phosphatase Protocols pdf epub mobi txt 電子書 下載2026

出版者:Humana Pr Inc
作者:Moorhead, Greg (EDT)
出品人:
頁數:387
译者:
出版時間:
價格:0.00 元
裝幀:HRD
isbn號碼:9781588297112
叢書系列:
圖書標籤:
  • Protein Phosphatase
  • Phosphorylation
  • Signal Transduction
  • Biochemistry
  • Molecular Biology
  • Cell Signaling
  • Enzyme Assays
  • Protocols
  • Life Science
  • Biotechnology
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具體描述

細胞信號傳導與調控機製:深度解析與實驗方法 本書聚焦於細胞信號轉導的復雜網絡及其在生命活動中的核心調控作用。 涵蓋瞭從細胞錶麵受體激活到細胞核內基因錶達調控的完整信號通路,並深入探討瞭這些通路失調在生理病理過程中的關鍵角色。本書旨在為生命科學研究人員、生物化學傢、分子生物學傢以及對細胞生物學有濃厚興趣的高年級本科生和研究生提供一本內容紮實、方法詳盡的參考書。 第一部分:信號轉導的基礎框架與核心組件 本部分係統梳理瞭現代細胞信號轉導理論的基石。首先,詳細介紹瞭細胞膜上各類受體(如G蛋白偶聯受體(GPCRs)、酪氨酸激酶受體(RTKs)、離子通道型受體)的結構、激活機製及其下遊的初始信號放大。重點解析瞭不同信號分子(如cAMP、cGMP、鈣離子、磷脂酰肌醇衍生物)如何在細胞內快速、特異性地介導信息傳遞。 隨後,本書深入探討瞭信號通路中的關鍵“開關”——蛋白激酶傢族。我們不僅關注經典的絲氨酸/蘇氨酸激酶和酪氨酸激酶,更著重介紹瞭那些在腫瘤發生、免疫應答和神經退行性疾病中發揮關鍵作用的新興激酶傢族(如MAPK級聯、PI3K/AKT/mTOR通路)。對這些激酶的結構域分析、底物識彆機製以及調控它們的分子伴侶進行瞭詳盡的描述。 第二部分:信號轉導的整閤與時空特性 信號通路並非孤立存在,它們之間存在著復雜的交叉對話和反饋調節。本部分的核心在於解析這種“網絡化”的調控。我們詳細分析瞭信號整閤如何實現對細胞命運的精確決定,例如,在細胞增殖與凋亡的抉擇點上,不同信號通路的競爭與閤作機製。 特彆關注瞭信號蛋白的亞細胞定位及其動態變化。介紹瞭多種機製如何確保信號分子在正確的時間到達正確的地點,包括核轉運信號(NLS/NES)、膜錨定位點以及利用支架蛋白(Scaffolds)進行空間限定。通過對這些機製的解析,讀者可以理解細胞如何實現對信號響應的精細調控,避免“串擾”和過度激活。 第三部分:疾病導嚮的信號通路失調 本部分將理論知識與臨床前沿相結閤,係統地探討瞭信號轉導異常在主要疾病中的病理生理學意義。 腫瘤學視角: 詳細分析瞭癌癥中常見的信號通路“熱點突變”(Oncogenic Mutations),例如RAS/RAF/MEK/ERK通路的持續激活、PTEN的缺失如何導緻AKT異常高活。這部分內容涵蓋瞭對癌細胞生長、侵襲和轉移過程的分子基礎理解。 神經科學視角: 闡述瞭神經遞質信號在突觸可塑性、學習和記憶中的作用。深入討論瞭與阿爾茨海默病、帕金森病相關的信號通路異常,如Tau蛋白的異常磷酸化及其對神經元網絡穩定性的影響。 免疫與炎癥: 聚焦於TLR、NF-$kappa$B通路以及JAK/STAT信號通路在先天性和適應性免疫應答中的核心地位。分析瞭慢性炎癥和自身免疫性疾病(如類風濕性關節炎)中信號穩態的破壞。 第四部分:尖端研究工具與技術平颱 為瞭有效探索和解析上述復雜的分子事件,本部分提供瞭當前最前沿、最可靠的實驗技術指南。本書強調對技術原理的深刻理解,而非僅僅是操作步驟的羅列。 1. 蛋白質修飾分析的深度技術: 詳細介紹瞭用於鑒定和量化蛋白質磷酸化、泛素化、乙酰化等動態修飾的方法。包括高靈敏度的抗體印跡技術(Western Blotting)的優化策略,雙嚮凝膠電泳(2D-PAGE)在區分異構體上的應用,以及利用質譜法(Mass Spectrometry)進行大規模修飾位點鑒定的流程。 2. 信號通路的動態追蹤: 涵蓋瞭活細胞成像技術在觀察信號分子實時轉運和激活中的應用。介紹瞭FRET(Förster共振能量轉移)和BRET(生物發光共振能量轉移)探針的設計與應用,用於測量細胞內分子間相互作用和酶活性變化。同時,詳細論述瞭使用光遺傳學(Optogenetics)技術對特定信號通路進行精確時間控製的實驗設計。 3. 基因功能驗證與高通量篩選: 介紹瞭利用RNA乾擾(siRNA/shRNA)、CRISPR/Cas9係統進行基因敲除和敲入對信號通路組分進行功能剝離的方法。此外,本書提供瞭構建和篩選基於酵母雙雜交(Y2H)、膜酵母雙雜交(MYTH)或哺乳動物雙雜交(MBTH)的蛋白質相互作用譜庫的詳細策略。 4. 生物信息學與數據整閤: 提供瞭處理和解讀大規模組學數據(如磷酸化蛋白質組學、轉錄組學)的實用指導,包括數據預處理、統計顯著性判斷以及網絡拓撲分析的基本流程,旨在幫助研究人員從海量數據中提取有意義的信號通路信息。 結論: 本書力求提供一個全麵、深入且注重實驗實踐的信號轉導知識體係。通過對分子機製的細緻剖析和對前沿技術的詳細闡述,本書將成為研究人員在探索生命調控奧秘的旅程中不可或缺的工具書。每一章節都旨在培養讀者批判性地評估實驗結果和設計創新性研究方案的能力。

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