Handbook of Molecular and Cellular Methods in Biology and Medicine

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出版者:CRC Press
作者:Donghern Kim
出品人:
页数:496
译者:
出版时间:1995-5-15
价格:USD 129.95
装帧:Hardcover
isbn号码:9780849325113
丛书系列:
图书标签:
  • 分子生物学
  • 细胞生物学
  • 生物医学
  • 实验方法
  • 生物技术
  • 实验室手册
  • 研究方法
  • 医学研究
  • 细胞技术
  • 分子技术
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具体描述

科学前沿探索:分子与细胞层面的生命奥秘 本书旨在为读者揭示生命科学最核心的层面——分子与细胞。我们将深入探索构成生命体的基本单元,理解其精妙的结构、复杂的运作机制以及它们如何协同作用,共同维系着生命的蓬勃发展。 第一部分:分子基石——生命的语言 在生命的宏伟画卷中,分子是绘就一切的笔触。本部分将带领读者走进分子世界,解读生命的语言。 核酸的奥秘:DNA与RNA DNA的结构与复制: 详细阐述DNA的双螺旋结构,这一令人惊叹的分子机器如何承载着遗传信息,以及它如何通过精确的复制过程代代相传,保证生命的延续。我们将审视DNA聚合酶、解旋酶等关键蛋白质的角色,以及半保留复制的原理。 RNA的功能与多样性: 探索信使RNA(mRNA)、转运RNA(tRNA)和核糖体RNA(rRNA)在蛋白质合成中的关键作用。还将介绍非编码RNA(ncRNA)家族,如微小RNA(miRNA)和长链非编码RNA(lncRNA),它们在基因表达调控中的新兴重要性。 基因的表达调控: 剖析从DNA到RNA再到蛋白质的中心法则。我们将深入研究转录因子、启动子、增强子等调控元件,理解细胞如何精细地控制哪些基因在何时何地表达,从而适应环境变化和执行特定功能。 蛋白质的王国:结构、功能与相互作用 氨基酸与蛋白质的形成: 解释氨基酸的结构特征以及它们如何通过肽键连接形成多肽链,最终折叠成具有特定三维结构的蛋白质。 蛋白质的结构层次: 从一级序列到四级结构,深入理解蛋白质精巧的折叠如何决定其功能。我们将探讨α-螺旋、β-折叠等二级结构,以及疏水相互作用、氢键、离子键、二硫键等稳定蛋白质三维结构的关键力量。 酶的作用机制: 详细介绍酶作为生物催化剂,如何极大地加速生化反应,以及其活性位点、底物特异性、竞争性与非竞争性抑制等关键概念。 蛋白质的相互作用网络: 探讨蛋白质如何并非孤立存在,而是形成复杂的网络,协同完成细胞内的各种任务。我们将触及蛋白质-蛋白质相互作用、蛋白质-核酸相互作用等,以及它们在信号转导、代谢通路中的作用。 脂质、碳水化合物与其他重要分子 脂质的多样性与功能: 介绍脂肪、磷脂、固醇等不同类型的脂质,以及它们在细胞膜构建、能量储存、激素合成等方面的至关重要作用。 碳水化合物的角色: 探索单糖、二糖、多糖,以及它们作为能量来源、结构支持(如纤维素、几丁质)和细胞识别信号的重要性。 维生素与辅酶: 介绍这些在代谢过程中不可或缺的有机小分子,它们如何作为酶的辅助因子,参与能量转化、氧化还原等关键生化过程。 第二部分:细胞的奥秘——生命的微观世界 细胞是生命的基本单位,是所有生命活动发生的场所。本部分将带领读者走进细胞内部,探索其精妙的构造和复杂的生命活动。 细胞的构造与器 细胞膜: 详细描述细胞膜的磷脂双分子层结构,以及镶嵌在其中的蛋白质,共同构筑了选择性通透的屏障。我们将探讨物质跨膜运输的各种机制,如被动扩散、易化扩散、主动运输、囊泡运输等。 细胞核: 介绍细胞核作为遗传信息的储存库,其双层核膜、核孔复合体以及内部的染色质结构。我们将理解核仁在核糖体合成中的作用。 细胞质与细胞器: 线粒体: 探索其能量工厂的称号,以及通过有氧呼吸产生ATP的生化过程。 内质网(粗面和滑面): 了解其在蛋白质合成、折叠、修饰以及脂质合成、解毒等方面的功能。 高尔基体: 揭示其在蛋白质和脂质的进一步修饰、分选和包装,以及向细胞内外的运输中的作用。 溶酶体与过氧化物酶体: 解释它们在细胞内物质降解、废物清除和代谢物分解中的关键作用。 细胞骨架: 介绍微管、微丝和中间纤维,它们如何为细胞提供结构支持、维持细胞形态、介导细胞运动和物质运输。 核糖体: 探索其在蛋白质合成中的直接参与。 细胞的生命活动 细胞的能量代谢: 糖酵解: 解释葡萄糖在无氧条件下分解为丙酮酸的过程。 三羧酸循环: 描述丙酮酸在有氧条件下进一步氧化分解,产生大量还原当量。 氧化磷酸化: 揭示电子传递链和化学渗透作用如何将氧化还原能转化为ATP。 细胞信号转导: 信号分子的识别: 介绍激素、神经递质、生长因子等信号分子,以及细胞表面和内部的受体如何识别这些信号。 信号的传递与放大: 阐述第二信使(如cAMP、Ca2+)、激酶级联等在信号放大和传递过程中的作用。 信号的应答: 解释细胞如何通过改变基因表达、酶活性、细胞运动等方式对信号做出响应。 细胞周期与细胞分裂: 细胞周期的调控: 深入理解细胞生长、DNA复制和分裂的各个阶段(G1、S、G2、M期),以及细胞周期检查点在保证遗传物质完整性中的关键作用。 有丝分裂与减数分裂: 详细描述细胞如何通过精确的染色体分离过程进行增殖,以及减数分裂在生殖细胞形成中的意义。 细胞凋亡(程序性细胞死亡): 探讨细胞如何通过内源性和外源性途径启动程序性死亡,以维持组织稳态、清除受损细胞。 细胞分化与干细胞: 介绍细胞如何从相对未分化的状态发展为具有特定形态和功能的细胞类型,以及干细胞在组织再生和发育中的潜能。 通过对分子和细胞层面的深入剖析,本书将为读者构建一个全面而深刻的生命科学知识体系,激发对生命奥秘的无限探索与思考。

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读后感

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我发现这本书在数据分析和结果解读方面的内容,虽然不如其分子操作部分详尽,但也提供了非常坚实的统计学基础。例如,在探讨流式细胞术(Flow Cytometry)中的补偿设置时,它不仅仅给出了一个简单的矩阵计算公式,而是深入分析了荧光光谱重叠的物理机制,并解释了为什么在不同的仪器和抗体组合下,补偿参数需要进行动态调整。对于初级研究人员而言,我们往往只关注“拿到数据”,却忽略了“数据质量”的源头控制。这本书恰恰弥补了这一点,它强调了从样本制备开始就应该纳入统计学考量。此外,它对生物学实验中常见的“假阳性”和“假阴性”的来源进行了系统性的分类讨论,这远比教科书上那种简单的定义要复杂和实用得多。在我最近进行的一个复杂的体内功能验证实验中,我正是参考了书中关于对照组设置的章节,才及时发现了实验设计中的一个潜在偏倚,避免了整个实验的失败。这本书更像是一个审慎的导师,时刻提醒你在兴奋地观察到“结果”时,不要忘记回顾实验设计的每一个环节是否足够严谨。

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这本书的封面设计得非常朴实,甚至有些老旧,但我一翻开目录,立刻被那种扎实严谨的学术气息所吸引。它不像市面上很多新出版的教材那样花哨,排版也略显拥挤,但每一个章节标题都精准地指向了生物医学研究中最核心、最基础的操作层面。我特别欣赏它对实验设计理念的强调,不仅仅是告诉你“怎么做”,更重要的是阐述“为什么这么做”。比如,在谈到细胞培养时,它详细对比了不同血清批次对细胞生长曲线的影响,这一点在很多快速指南中是会被一笔带过的。对于一个刚进入实验室的本科生来说,这本书简直是救命稻草,它把我从那种“对着试剂瓶发呆”的状态中解救出来,让我明白了每一个缓冲液的配比背后都蕴含着深刻的分子生物学原理。它对于Western Blotting技术的故障排除部分尤其精彩,从抗体二抗的孵育时间到洗涤步骤的优化,都有非常细致的表格总结,简直可以作为实验台边的“圣经”。虽然有些初级的操作在网上也能找到类似视频,但这本书提供的理论深度和系统性是视频无法比拟的,它构建了一个完整的知识框架,让你在面对未知问题时,能基于原理进行推理,而不是仅仅依赖于死记硬背步骤。

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初次接触这本厚重的工具书时,我正在为一个棘手的蛋白质纯化项目焦头烂额。市面上关于亲和层析(Affinity Chromatography)的描述往往停留在原理层面,但这本书的描述则深入到了操作的“艺术”层面。它用一种近乎“唠叨”的细致,探讨了洗脱缓冲液pH值微小波动对目标蛋白构象稳定性的潜在影响,以及如何通过梯度洗脱来有效分离具有相似结合亲和力的杂蛋白。我印象最深的是关于质谱前处理的一章,作者非常坦诚地指出了不同酶解方法的局限性,比如胰蛋白酶在某些特定残基上的切割效率低下问题,并提供了一套基于多酶联合消化的优化方案,这种近乎“内幕消息”的分享,极大地提高了我的数据产率和可重复性。这本书的优势在于,它不是那种只会罗列标准SOP(标准操作流程)的死板手册,它更像是一位经验极其丰富的资深PI(首席研究员)在手把手教你如何应对真实世界中那些变幻莫测的实验干扰因素。阅读过程中,我感觉自己仿佛坐在那位老教授的身边,他一边泡着浓咖啡,一边用低沉的声音告诉我:“记住,实验中90%的问题都不是方法本身错了,而是细节出了岔子。”

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这本书的实用性体现在它对那些“非标准”情况的处理上。如果你的目标是发表一篇关于新颖方法的论文,这本书可能无法提供最前沿的、尚未发表的优化技巧。但是,如果你的目标是确保日常实验的稳健性,并能处理各种突发状况,那么它几乎是无价之宝。我记得有一次,我们使用的特定细胞系对手术洗涤液中的某种常用添加剂表现出异常的敏感性,导致细胞凋亡率激增。在查阅了大量在线资源无果后,我翻阅了本书中关于细胞系特异性培养条件调整的附录。虽然书中没有直接提及我的具体细胞系,但它提供了一套基于离子强度和渗透压变化来系统筛选培养基优化方案的框架。通过应用这个框架,我们迅速找到了替代性的洗涤液配方,挽救了实验进程。这种解决问题的能力,源于书中对基础化学和物理原理的深刻理解,而不是简单的配方照搬。它教会我的不是“做什么”,而是“如何思考和调整”。这本书无疑是分子生物学和医学研究实验室的必备参考,它代表了一种对科学严谨性的承诺。

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这本书的排版风格,坦率地说,非常不符合现代读者的阅读习惯。字体小,行间距紧凑,图表也多采用黑白线条图,缺乏那种鲜艳的、能抓住眼球的彩色图像。如果仅仅是为了快速查找某个简单步骤,我更倾向于去查阅最新的文献综述或者在线数据库。然而,一旦你沉下心来,试图理解某一复杂技术的内在逻辑时,这本书的价值就显现出来了。比如,在讲解基因编辑技术时,它并没有直接跳到CRISPR/Cas9的神奇之处,而是花了大量的篇幅回顾了ZFN和TALEN的原理、限制以及它们在脱靶效应上的历史教训。这种“追根溯源”的叙事方式,使得读者对现有技术的发展脉络有了清晰的认识,而不是盲目追随热点。它对于一些相对“过时”但依然重要的经典技术,如DNA测序的Sanger法,依然给予了足够的尊重和详细的步骤描述,这对于理解现代高通量测序技术背后的技术瓶颈非常有帮助。总而言之,它要求读者付出专注力,但回报的却是深厚的底层知识积累。

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