实验动物 近交系小鼠、大鼠免疫标记检测法

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isbn号码:9780661357743
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具体描述

图书名称: 实验动物 近交系小鼠、大鼠免疫标记检测法 图书简介 本书系统而详尽地介绍了在实验动物领域,特别是近交系小鼠与大鼠模型中,应用免疫学标记技术进行细胞和组织分析的核心方法与实践指南。全书内容紧密围绕实验动物的特异性需求,从基础理论到具体操作规程,旨在为生物医学研究人员、动物实验技术人员及相关领域的学生提供一本兼具理论深度与实用价值的参考手册。 第一部分:基础理论与模型概述 本部分首先回顾了实验动物免疫学的基础概念,重点阐述了近交系小鼠(如C57BL/6、BALB/c)和大鼠(如Sprague-Dawley、Wistar)在免疫学研究中的重要性及其遗传背景对实验结果的潜在影响。详细介绍了免疫标记技术所依赖的分子机制,包括抗原-抗体反应的特异性与亲和力。内容涵盖了不同类型免疫球蛋白(IgG、IgM等)的结构与功能,单克隆抗体和多克隆抗体的制备、纯化及其在实验中的选择标准。此外,还深入探讨了细胞表面标志物和胞内标志物的生物学意义,为后续的实验设计奠定坚实的理论基础。 第二部分:免疫标记技术的核心方法 本部分是全书的技术核心,详细阐述了用于检测实验动物组织和细胞的各种免疫标记技术。 一、 免疫组织化学(IHC)与免疫细胞化学(ICC): 固定与包埋技术: 针对不同组织和标志物的特性,详细介绍了甲醛固定、酒精固定等方法的选择,以及石蜡包埋、冷冻包埋的具体操作步骤,强调了如何最大程度地保持组织抗原性。 抗体预处理: 重点讲解了抗原修复技术(热修复、酶修复)的原理与优化参数,这是提高信噪比的关键步骤。 染色体系与显色方法: 系统比较了基于酶联(如HRP、AP)的直接法、间接法、PAP法和ABC法的优劣。对荧光免疫组织化学(Fluorescence In Situ Hybridization, FISH的免疫学应用)的原理和多重染色策略进行了深入探讨。 定量分析与图像处理: 介绍了如何使用显微成像系统对IHC/ICC结果进行半定量(如H-score)和定量分析,以及如何校正背景染色和荧光淬灭问题。 二、 流式细胞术(Flow Cytometry, FC): 血液学样品制备: 针对近交系小鼠和大鼠的脾脏、淋巴结、骨髓以及外周血淋巴细胞的分离、单个化和染色技术,强调了去聚集和抗体孵育的最佳条件。 单色与多色上样策略: 详细介绍了用于鉴定Treg、Th17、B细胞亚群、髓系抑制细胞(MDSC)等关键免疫细胞群的多参数组合设计。特别关注了补偿(Compensation)的设置与校正,以应对荧光光谱重叠问题。 仪器操作与数据解读: 涵盖了仪器启动、光路调节、阈值设定,以及如何利用“活细胞门控”、“双阳性/双阴性分析”等策略,准确识别并计数特定细胞群。 三、 免疫印迹法(Western Blotting, WB): 组织匀浆与蛋白提取: 针对小鼠大鼠不同器官组织(如脑、肝、肾)的蛋白提取方法优化,特别是如何减少蛋白酶降解和内源性干扰物的抑制。 SDS-PAGE分离与转膜: 详细指导了针对不同分子量蛋白质的分离胶浓度选择,以及湿转与半干转技术的参数控制,以确保高分子量蛋白的有效转移。 抗体孵育与显影: 阐述了封闭液的选择(BSA与脱脂奶粉的适用性)、一抗和二抗的稀释度优化,并系统介绍了化学发光(ECL)和荧光检测的灵敏度比较与应用场景。 第三部分:特定免疫学应用的实践案例 本部分将理论和技术融入到具体的实验模型中,提供了高度实用的操作流程。 炎症模型评估: 以佐剂诱导的关节炎模型或LPS刺激为例,指导如何通过流式细胞术检测关节滑膜或外周血中巨噬细胞、中性粒细胞的募集情况,以及IHC检测组织炎症因子的表达。 肿瘤免疫微环境分析: 聚焦于皮下或原位肿瘤模型中免疫细胞浸润的分析。详细介绍了肿瘤组织解离方案,以及如何利用多色流式(如CD4/CD8/Foxp3)和组织荧光成像来描绘肿瘤内T细胞耗竭状态。 疫苗与抗体应答检测: 阐述了如何通过ELISA(酶联免疫吸附测定)和ELISPOT(酶联免疫斑点试验)来定量检测动物血清中特异性抗体的产生水平,以及体内产生效应T细胞的频率。 第四部分:质量控制与问题排查 本部分强调了实验的可靠性和可重复性,提供了常见问题的解决方案: 假阳性与假阴性: 深入分析了高背景染色、非特异性结合、内源性免疫球蛋白干扰等现象的原因,并提供针对性的解决方案,如使用Fc阻断剂、优化抗体孵育时间等。 数据标准化与生物学重复: 强调了在近交系动物实验中,控制环境因素(温度、湿度、饲料)对免疫反应一致性的影响,并指导如何合理设置生物学重复和技术重复。 本书力求成为实验动物免疫标记技术操作人员的“工作手册”,内容翔实,图文并茂,所有步骤均基于成熟的实验室操作规范,确保读者能够高效、准确地完成复杂的免疫学检测任务。

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读后感

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用户评价

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作为一名从事药物研发的工程师,我深切理解实验动物模型在药物筛选和评估中的核心地位。而近交系小鼠和大鼠,因其高度的遗传均一性,是我们进行精确、可重复性研究的首选模型。尤其是在评价药物对免疫系统的影响,或者利用免疫系统来治疗疾病时,对免疫标记的精准检测是必不可少的环节。《实验动物近交系小鼠、大鼠免疫标记检测法》这个书名,无疑正中我的下怀。 我非常期待这本书能提供一套标准化的、可操作性强的免疫标记检测流程,能够适用于各种常见的药物研发场景。例如,在评估一种新型免疫调节剂的疗效时,我们需要能够精确地检测它是否能够诱导特定免疫细胞的增殖、分化或功能激活,以及它对体内细胞因子、趋化因子等生物标志物水平的影响。这本书能否提供针对这些关键指标的、经过验证的ELISA、Western Blot、流式细胞术等方法的详细操作指南?另外,在进行长期给药或不同剂量给药的实验时,如何设计和优化免疫标记检测方案,以捕捉药物的剂量效应和时间效应,也是我关注的重点。如果书中还能涉及一些针对特定药物靶点,或者在特定疾病模型(如自身免疫病、炎症性疾病)中,如何进行更深入、更精细的免疫标记检测,那将极大地提升我进行药物研发的效率和信心。

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这本《实验动物近交系小鼠、大鼠免疫标记检测法》听起来像是一本非常专业且实用的书籍,对于我这样一个在生命科学领域摸爬滚打多年的研究人员来说,绝对是值得深入探究的。我一直对免疫标记技术在实验动物模型中的应用抱有浓厚的兴趣,尤其是在近交系小鼠和大鼠这类被广泛使用的模型中,它们的基因背景高度同质化,这使得研究结果的可重复性大大提高,但也意味着在免疫反应的细节上可能存在我们尚未完全掌握的细微差别。因此,如果这本书能够详细阐述如何运用各种免疫标记技术,比如免疫组化、免疫荧光、Western Blot、ELISA等,来精准地检测近交系小鼠和大鼠体内的特定免疫分子,如细胞因子、抗体、免疫细胞标志物等的表达水平和分布,那将极大地帮助我们更深入地理解疾病发生发展的机制,评估新药或疗法的效果,甚至优化动物模型的建立和维护。 我特别期待书中能够提供具体的实验操作指南,不仅仅是理论层面的讲解,更希望有详细的步骤、试剂的选择、优化的条件、常见问题的排除以及结果的判读标准。例如,在免疫组化方面,针对近交系小鼠和大鼠的不同组织,抗原修复的方法、一抗的选择和稀释度、二抗的偶联方式、信号放大策略以及染色强度的评估,这些都是影响实验成败的关键因素。对于免疫荧光,如何选择合适的荧光染料,如何避免背景荧光干扰,如何进行多重染色以同时检测多个靶点,这些技术细节的阐述至关重要。此外,书中是否会涉及一些前沿的免疫标记技术,比如流式细胞术在免疫细胞表型分析中的应用,或者更灵敏的质谱流式技术,这些都能为研究提供更全面的信息。

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读到《实验动物近交系小鼠、大鼠免疫标记检测法》这个书名,我立刻联想到了我在科研实践中常常遇到的挑战。我主要从事神经科学领域的研究,近年来,神经免疫学越来越受到关注,而实验动物,特别是近交系小鼠和大鼠,是我们探索大脑疾病中免疫细胞功能和信号通路的关键工具。神经系统本身的复杂性,加上免疫反应的动态变化,使得免疫标记技术的应用显得尤为重要,但同时也极具挑战性。 我期望这本书能够为我们提供一套系统、全面的免疫标记检测方法。例如,针对脑组织,如何在保存其三维结构的完整性的前提下进行高效的免疫染色?如何区分和标记不同类型的胶质细胞(如小胶质细胞、星形胶质细胞)以及神经元表面的免疫相关分子?书中是否会详细介绍针对不同神经递质受体、细胞因子受体、免疫检查点分子等在神经系统中表达的抗体选择和染色优化方案?我还对如何进行多重免疫荧光染色,以同时观察神经元、免疫细胞以及它们之间的相互作用感兴趣。如果书中还能包含一些关于组织透明化技术在神经免疫研究中的应用,以及如何利用这些技术来研究神经退行性疾病、感染性疾病或损伤后的免疫反应,那将极大地拓展我的研究思路。

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作为一名刚刚接触实验动物免疫学研究的新手,我对于《实验动物近交系小鼠、大鼠免疫标记检测法》这本书充满了期待,也带着一丝对未知领域的敬畏。我听说近交系小鼠和大鼠在免疫学研究中扮演着举足轻重的角色,它们的同质化基因背景能够最大程度地减少个体差异对实验结果的影响,从而使研究结论更加可靠。然而,如何准确地捕捉和量化它们体内复杂的免疫信号,一直是我学习的重点和难点。这本书的标题直接点出了核心——“免疫标记检测法”,这让我看到了解决问题的希望。 我希望书中能够从基础知识讲起,例如,什么是免疫标记?它在实验动物研究中有何重要性?然后再逐步深入到针对近交系小鼠和大鼠的具体技术。我尤其关心书中是否会详细介绍各种检测方法的原理、优缺点、适用范围以及操作流程。比如,对于免疫组化,我希望能了解如何选择合适的抗体,如何处理组织样本,如何进行染色和封片,以及如何解读染色结果。对于ELISA,我希望能知道如何设计实验,如何选择合适的酶联抗体,如何进行定量检测,以及如何分析数据。如果书中还能包含一些实际案例分析,展示如何运用这些技术来解决特定的免疫学问题,那对我的学习将是莫大的帮助。

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这本书的出现,对于我这样一个常年与实验动物打交道,尤其是在肿瘤免疫治疗领域工作的研究者来说,简直就是雪中送炭。近交系小鼠和大鼠作为我们研究药物疗效、评估肿瘤微环境变化的关键模型,它们的免疫系统反应是评估疗效的核心指标。过去,我们在使用免疫标记技术时,常常会遇到一些瓶颈,比如实验结果的变异性过大,或者某些关键免疫细胞的亚群分析不够精细。我非常希望这本书能够深入探讨近交系小鼠和大鼠特有的免疫学特性,并针对这些特性,提供优化免疫标记检测方法的指导。 我尤其关注书中是否会介绍一些更加精准和高效的免疫标记技术,能够帮助我们更清晰地描绘肿瘤微环境中T细胞、B细胞、巨噬细胞、树突状细胞等各类免疫细胞的分布、数量和功能状态。例如,多重免疫荧光技术在识别肿瘤浸润淋巴细胞亚群,以及它们与肿瘤细胞相互作用方面的应用,能否在这本书中得到详尽的阐述?此外,对于血清或组织液中的细胞因子、趋化因子等可溶性免疫介质的定量检测,ELISA和Luminex等技术如何进行优化以获得更可靠的数据,也是我非常感兴趣的部分。如果书中还能提供一些关于如何避免非特异性染色、提高信号信噪比以及有效处理动物模型特有样本(如脾脏、淋巴结、肿瘤组织)的技巧,那将非常有价值。

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