具体描述
《21世纪医药院校实验规划教材•病原生物与免疫学实验指导》分三篇，共计11次实验。按免疫学、病原微生物学和人体寄生虫学的顺序编写，每次实验包括：实验目标、实验原理及材料、实验步骤、实验报告及思考题等。书后有附录，涵盖实验室常用器材的处理与消毒灭菌，常用染色液、消毒液和清洁液的配制方法等。
编写中力求“贴近学生、贴近社会、贴近岗位”。《21世纪医药院校实验规划教材•病原生物与免疫学实验指导》特色在于把实验报告部分按作业本的形式编写，留有空白供学生填写，在规范学生书写实验报告的同时，也便于教师批改；内容详实，层次清晰，实用性强，适用于高职高专医学类各专业，也可作为中等卫生职业学校的实验参考用书。各院校在使用中，可根据本校实际进行取舍。
实验方法学在分子生物学研究中的应用 导论：从基础理论到实验实践的桥梁 本书旨在为生命科学领域的科研工作者和高年级学生提供一套全面、深入的实验方法学指导，重点聚焦于当前分子生物学研究中最常用且最核心的技术。在生命科学飞速发展的今天，扎实的实验技能是任何创新性研究得以实现的基础。本书不探讨具体的生物学领域知识（如细胞信号通路或遗传学），而是专注于“如何做”——即从样本的预处理到复杂数据分析的完整实验流程与质量控制。我们相信，掌握精妙的实验技术，比仅仅了解理论知识更为关键。 本书结构清晰，力求将抽象的技术原理与具体的实验操作步骤紧密结合，确保读者在实际操作中能够游刃有余，并具备解决实验中突发问题的能力。 --- 第一部分：分子操作的基石——核酸的提取、纯化与定量 核酸（DNA和RNA）是所有分子生物学研究的起点。本部分详细阐述了从不同来源（如血液、组织、细胞培养物）高效提取高质量核酸的策略与技术要点。 第一章：核酸提取的原理与优化 1.1 细胞裂解技术：机械破碎、化学裂解与酶解法的适用性分析。 1.2 酚氯仿抽提法的细致步骤与安全规范：重点讨论相分离的控制和有机溶剂残留的去除。 1.3 固相萃取技术（硅胶柱/磁珠法）的机制：选择性吸附、洗脱条件的优化，以及如何最大程度减少蛋白质和盐类的污染。 1.4 组织匀浆技术：冷冻研磨法与机械匀浆器的选择标准，以及对不同组织硬度的适应性调整。 第二章：核酸的质量控制与精确定量 2.1 紫外分光光度计的应用：A260/A280和A260/A230比值的生物学意义及其对下游实验的指导。 2.2 荧光定量检测：使用PicoGreen、Qubit等试剂盒的原理，相比于紫外法的优势与局限性。 2.3 电泳分析：琼脂糖凝胶与变性聚丙烯酰胺凝胶电泳（PAGE）的选择；如何通过标记物判断核酸的完整性。 2.4 RNA的降解识别：严格区分DNA污染与RNA降解的电泳特征及处理方法。 --- 第二部分：基因表达分析的核心技术——PCR及其衍生方法 聚合酶链式反应（PCR）是分子生物学的“瑞士军刀”。本部分深入解析了PCR从基础扩增到高精度定量的全过程控制。 第三章：标准PCR与热循环仪的精确设置 3.1 引物设计原则：Tm值的计算、二级结构预测与特异性验证。 3.2 反应体系的优化：镁离子浓度、dNTP配比对扩增效率的影响。 3.3 PCR程序优化：退火温度的梯度优化（Touchdown PCR）策略。 3.4 凝胶验证：判断扩增产物的特异性、大小与产量的可视化方法。 第四章：实时荧光定量PCR（RT-qPCR）的严谨性 4.1 逆转录（RT）效率的评估：一步法与两步法的选择；引物（随机引物、寡聚dT、基因特异性引物）的选择策略。 4.2 荧光检测原理：SYBR Green染料与TaqMan探针系统的对比。 4.3 标准曲线的建立与线性范围的确定：确保定量结果的可重复性。 4.4 基因表达水平的相对与绝对定量计算：$2^{-DeltaDelta C_t}$法的深入应用与误差分析。 第五章：高级PCR技术拓展 5.1 差别性显示PCR（DD-PCR）与抑制性消减杂交（SSH）的基本思路。 5.2 DNA测序的制备与分析：Sanger法测序的准备工作与结果判读。 5.3 甲基化特异性PCR（MSP）的原理与操作细节。 --- 第三部分：蛋白质研究的工具箱——分离、鉴定与修饰分析 蛋白质是生命活动的执行者，其研究需要依赖高效的分离和检测技术。 第六章：蛋白质的提取与初步纯化 6.1 细胞内与细胞外蛋白的提取差异：膜蛋白、核蛋白与胞浆蛋白的差异化裂解液配方。 6.2 蛋白酶抑制剂鸡尾酒的配制与使用时机：防止蛋白降解的关键步骤。 6.3 沉淀法与初步浓缩：硫酸铵分级沉淀的操作规范。 第七章：电泳分离技术：SDS-PAGE与2D电泳 7.1 SDS-PAGE的原理与胶体配制：凝胶浓度对分离效果的影响（重组胶/梯度胶的应用）。 7.2 蛋白质的转移（转膜）：湿法与半干法转膜的效率对比与优化。 7.3 蛋白质的银染与考马斯亮蓝染色：灵敏度与背景干扰的控制。 7.4 双向电泳（2D-PAGE）的预处理与等电聚焦技术。 第八章：免疫学检测的精确性 8.1 酶联免疫吸附测定（ELISA）的优化：包被效率、封闭液的选择与底物显色的时间控制。 8.2 免疫印迹（Western Blotting）的精细步骤：抗体的稀释度、孵育条件与信号的增强技术（化学发光）。 8.3 免疫组织化学（IHC）与免疫荧光（IF）：抗原修复的重要性与荧光信号的共定位分析。 --- 第四部分：实验设计、数据处理与实验室安全规范 一个成功的实验，始于严谨的设计和终于负责任的报告。 第九章：实验设计与统计学基础 9.1 实验组、对照组与重复设置的科学性：内源对照与外源对照的选择。 9.2 样本量估算与统计功效分析的初步概念。 9.3 数据的正态性检验与参数/非参数检验的选择：t检验、方差分析（ANOVA）的应用边界。 9.4 结果的可视化：误差棒（标准差与标准误）的正确表示方法。 第十章：实验室规范与质量管理 10.1 试剂的配制与储存：缓冲液的pH校准、灭菌方法（过滤与高压蒸汽灭菌）的选择。 10.2 仪器维护与校准：离心机、移液器和pH计的日常维护规范。 10.3 生物安全与化学品管理：生物安全等级（BSL）的识别、废液的分类处理流程。 本书的撰写目标是为读者提供一个坚实的实验操作“蓝图”，确保每一次实验都能在理论指导下，以最高的效率和可靠性完成。掌握这些技术，是迈向独立科研工作者最重要的一步。
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