膜片钳技术及其应用

出版者:科学出版社

作者:康华光等编

页数:0

出版时间:2003-01-01

价格:40.0

装帧:平装

isbn号码:9787030108869

具体描述

本书由国家自然科学基金委员会优秀研究成果专著出版基金资助出版。它是作者在"膜片钳技术及其应用"领域所进行的研究工作的总结，同时也吸取了国际上的先进技术和新近的研究成果。内容包括:细胞电生理与膜片钳技术，膜片钳系统的组建及实验技术概要，膜片钳放大器原理与低噪声设计，单通道和全细胞电流记录技术，数据采集和分析，细胞分泌活动的膜电容监测技术和安培测量技术，细胞内钙离子浓度的测量及钙库

目录信息

序
1细胞电生理与膜片钳技术
11细胞的结构
12细胞膜的化学组成
13生物电信号的离子机制
14生物电信号测量基础
15电生理实验中的基本方法
16重要概念小结
2膜片钳系统的组建及实验技术概要
21细胞膜离子通道的分类和通道电流的记录模式
22膜片钳实验系统的组建
23系统接地
24玻璃微电极控制工艺及设备
25实验技术概要
26重要概念小结
3膜片钳放大器原理与
· · · · · · (收起)

用户评价

这本书的深度和广度都超出了我的预期。它不仅涵盖了膜片钳技术的基础理论和操作规程，还将这项技术与多种细胞模型和生物学问题紧密结合。我尤其被书中关于膜片钳技术在药物筛选和毒理学评价中的应用所吸引。书中详细介绍了如何利用膜片钳技术快速、准确地评估化合物对离子通道活性的影响，以及如何通过高通量膜片钳平台来加速新药的研发进程。例如，在研究某个新化合物对心脏离子通道的影响时，书中提供的记录方案和数据分析方法，让我能够高效地获得可靠的结果。此外，书中还探讨了如何利用膜片钳技术来研究离子通道在疾病发生发展中的作用，例如囊性纤维化、遗传性耳聋、癫痫等，通过具体的案例分析，我深刻体会到膜片钳技术在揭示疾病发病机制和寻找治疗靶点方面的巨大潜力。这种将基础技术与临床应用紧密联系的写作方式，极大地激发了我对生命科学研究的兴趣。

这本书的内容涵盖了膜片钳技术的各个方面，并且在每一个方面都做得非常扎实。我特别欣赏书中对于不同数据分析方法的介绍，从基本的电流-电压关系曲线的绘制，到更复杂的动力学模型拟合，都进行了详细的讲解。书中还提供了关于如何使用一些常用的数据分析软件的教程，这对于我这样的初学者来说，大大降低了数据分析的门槛。我尝试了书中介绍的利用单通道记录来研究离子通道的开放和关闭动力学，并试图将其与不同的膜电位和配体浓度联系起来，这为我理解离子通道的调控机制提供了重要的实验依据。书中还提到了利用膜片钳技术结合荧光成像技术来研究离子通道在细胞内的分布和动态变化，这种多学科交叉的实验设计，也为我提供了新的研究思路。总的来说，这本书不仅是一本技术手册，更是一本启发研究灵感的宝库。

这本书的作者显然是一位经验丰富的膜片钳实验者，他将自己在多年的实验实践中积累的宝贵经验毫无保留地分享给了读者。我尤其欣赏书中对于“封接”这一关键步骤的细致讲解，作者不仅介绍了各种可能影响封接成功率的因素，还提供了一系列实用的技巧来克服这些困难。例如，如何通过改变玻璃拉制参数来获得不同直径和锥度的微电极，如何通过微调火烤的温度和时间来获得高电阻的封接，以及如何通过轻微的负压来促进封接的形成。这些“秘诀”级的指导，是许多教科书中难以获得的。书中还详细介绍了如何进行细胞膜的去除非特异性吸附处理，以减少伪迹的产生，以及如何进行电极的刻度校准，以确保测量结果的准确性。我尝试了书中介绍的“电流-电压关系”的测量方法，并利用这些数据来计算离子通道的电导，这为我理解离子通道的电生理特性提供了坚实的基础。这本书的实践性非常强，让我对膜片钳技术的掌握有了质的飞跃。

作为一名即将开始进行电生理实验的研究生，我深知膜片钳技术的重要性。这本书就像是为我量身定制的一本指南，它不仅传授了扎实的理论知识，更重要的是，它教会了我如何将这些知识转化为实际操作。书中关于如何在全细胞记录模式下获得稳定、低噪声的电流记录的技巧，对我来说是无价之宝。作者分享的关于电极内部液配制的经验，以及如何根据不同细胞类型和研究目的调整其成分，对于优化记录质量起到了关键作用。我特别赞赏书中关于如何进行外周膜片记录的讲解，这是一种相对较少被初学者接触但却非常重要的技术，能够帮助我们研究细胞膜上特定区域的离子通道功能。书中的实验步骤描述得非常详尽，几乎达到了“手把手”教学的程度，让我对实验流程了然于胸，大大减少了初次操作时的紧张感和不确定性。即使是对于数据分析中可能遇到的统计学问题，书中也提供了一些实用的建议和工具的介绍，这对于保证研究结果的严谨性非常重要。

作为一名对生命科学充满好奇心的学生，我一直想深入了解那些隐藏在细胞膜上的微小“门”。这本书为我打开了一扇通往膜片钳技术世界的大门。它不仅详细介绍了这项技术的历史渊源和发展脉络，更重要的是，它以一种生动有趣的方式阐述了这项技术是如何让我们能够“听到”细胞膜上离子流动的“声音”。书中对于“单通道记录”的讲解尤其让我着迷，作者通过形象的比喻，让我能够理解是如何在万亿分之一安培的电流中捕捉到单个离子通道的开放和关闭瞬间。我还对书中介绍的“电压钳”和“电流钳”模式的原理和应用有了清晰的认识，并理解了它们分别适用于研究哪些类型的离子通道和生物过程。这本书也帮助我认识到，膜片钳技术不仅仅是一种记录技术，更是一种强大的研究工具，它能够帮助我们解答关于生命本质的许多深刻问题。

这本书的内容组织逻辑非常严谨，结构清晰，每一章节都像是在为下一章节打下坚实的基础。从膜片钳技术的原理出发，循序渐进地讲解了如何搭建实验系统、如何进行电极的制作和优化、以及如何在不同的实验条件下进行膜片钳记录。我特别欣赏作者在讲解电生理信号的放大和滤波时，并没有简单地罗列参数，而是深入分析了不同参数对信号质量的影响，以及如何根据实验对象和研究目的进行合理的设置。书中还详细阐述了各种伪迹的产生原因和排除方法，这对于提高实验的可靠性至关重要。当我遇到实验瓶颈时，翻阅本书的相应章节，总能找到解决问题的线索。例如，在处理高电阻封接问题时，书中提供的关于玻璃表面处理和封接温度的建议，对我帮助很大。更让我印象深刻的是，书中不仅关注了技术本身，还将膜片钳技术在神经科学、心血管生理学、离子通道疾病研究等多个领域的广泛应用进行了详细的介绍，通过生动的案例，我得以窥见这项技术在推动生命科学研究前沿发展中的重要作用。书中的图表和示意图也设计得十分精良，能够直观地展示复杂的实验装置和信号变化，极大地促进了我的理解。

这本书的语言风格非常吸引人，作者以一种引人入胜的方式讲述了膜片钳技术的方方面面。它不像一些学术专著那样枯燥乏味，而是充满了探索的乐趣。在阅读过程中，我仿佛置身于一个充满挑战和惊喜的实验现场。书中对于如何在不同环境下进行膜片钳记录的讨论，比如在原位组织切片中、在斑马鱼胚胎中、甚至是在培养的细胞系中，都提供了非常详细的指导。我尤其对书中介绍的“巨膜片”记录技术印象深刻，虽然它与“单通道”记录有所不同，但在某些研究问题上具有独特的优势，书中对其原理和应用也进行了清晰的阐述。对于初学者来说，很多时候最大的困难在于如何克服“封接”这一关键步骤，本书在这方面提供了非常多的“实操秘诀”，包括如何选择合适的玻璃，如何掌握火烤的温度和时间，以及如何识别和排除封接过程中可能出现的问题。这些细节上的指导，对于提高实验成功率至关重要。

这本书以一种非常接地气的方式，深入浅出地讲解了膜片钳技术，这对于我这样初次接触这项技术的学生来说，简直是及时雨。作者并没有一开始就抛出枯燥的理论公式和晦涩的术语，而是从膜片钳技术的发展历程、它如何解决生物学研究中的关键问题开始，一步步引导读者进入这个迷人的领域。我在阅读过程中，能够清晰地感受到作者在梳理知识点时所下的苦功，他将复杂的概念拆解成易于理解的部分，并通过大量的实例来佐证理论。特别是关于电极的制备和封接部分，详细描述了从玻璃管的选择、拉制，到火烤、封接的每一个细节，甚至连一些容易被忽略的“窍门”也一一列举，这使得我在实际操作中少走了很多弯路。书中对于不同类型的膜片钳配置（如全细胞记录、细胞内记录、细胞外记录等）的讲解也十分到位，并对比了它们的优缺点和适用场景，帮助我能够根据自己的研究需求做出更明智的选择。此外，书中还涉及了数据采集和分析的软件介绍，虽然只是初步的指导，但足以让我对后续的工作有一个初步的认识。这本书并非一本单纯的实验手册，它更像是一位经验丰富的导师，在我探索膜片钳技术应用的道路上，给予了我最宝贵的启示和指导。我尤其喜欢书中对于“如何避免常见错误”这一章节的详尽描述，这些都是我们在实验室中实操时最可能遇到的问题，有针对性的指导能够极大地提高实验效率和成功率。

这本书的作者对膜片钳技术有着极其深刻的理解，并将这种理解以一种非常易于接受的方式传达给了读者。在介绍膜片钳技术的基本原理时，作者不仅解释了电学理论，还深入探讨了相关的生物物理学概念，例如膜电位、动作电位、离子通道的电导等，这些都为理解膜片钳记录的意义打下了坚实的基础。我非常喜欢书中对于如何优化实验条件的详细讨论，包括如何控制温度、pH值、离子浓度等，这些因素都会显著影响膜片钳记录的质量。书中还探讨了如何进行细胞的固定和通透化处理，以便进行胞内应用，或者进行后续的免疫荧光标记。这些精细的操作步骤，对于保证实验结果的准确性和可重复性至关重要。此外，书中还介绍了如何利用膜片钳技术来研究G蛋白偶联受体（GPCRs）介导的信号传导通路，这对于理解细胞信号转导机制非常有帮助。

我一直对离子通道的功能和调控机制非常感兴趣，而膜片钳技术正是研究这些问题的金标准。这本书的出现，可以说是满足了我对膜片钳技术及其应用的全方位需求。作者在介绍技术原理时，不仅深入到离子通道的电学特性，还联系到了其在细胞膜上的定位、构象变化等微观层面，为我提供了对离子通道功能的更深层次的理解。书中对于电压门控离子通道、配体门控离子通道、以及机械门控离子通道等不同类型离子通道的膜片钳记录策略和数据分析方法都进行了详细的阐述，这对于我理解不同类型通道的调控机制非常有帮助。特别是关于突变体表达和功能分析部分，书中详细介绍了如何通过基因工程手段引入突变，并通过膜片钳技术来评估这些突变对离子通道开放动力学、选择性等方面的影响，这为我设计相关的研究项目提供了重要的思路。我尝试了书中介绍的利用钙离子指示剂结合膜片钳记录来研究细胞内钙信号的变化，效果非常显著，大大提升了我对细胞信号转导过程的理解。