Whole Genome Amplification pdf epub mobi txt 电子书下载 2026

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出版者:Cold Spring Harbor Laboratory Pr

作者:Hughes, S. (EDT)/ Lasken, R. (EDT)

出品人:

页数:193

译者:

出版时间:

价格:125

装帧:HRD

isbn号码:9781904842187

丛书系列:

图书标签:

全基因组扩增
WGA
基因组学
分子生物学
PCR
扩增技术
DNA扩增
低输入量DNA
下一代测序准备
生物芯片
遗传学

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具体描述

基因组学前沿：从单细胞到宏基因组的深度解析本书旨在为生命科学研究者、生物技术专业人员以及高年级本科生和研究生提供一个全面而深入的指南，聚焦于当前基因组学领域最前沿、最具挑战性的研究方向和技术平台。本书内容涵盖了超越传统全基因组扩增技术范畴的广阔图景，着重阐述了高通量测序（NGS）技术如何驱动基础研究、临床诊断和环境科学的革命性进展。 --- 第一部分：单细胞组学革命与空间转录组学随着测序成本的下降和灵敏度的提升，研究的尺度已然下沉至细胞的微观世界。本部分将详细剖析当前单细胞分析技术的演进及其在揭示细胞异质性方面的关键作用。 1. 单细胞测序技术（sc-seq）的深度解析我们将详细回顾并比较目前主流的单细胞RNA测序（scRNA-seq）平台，包括但不限于：基于液滴的微流控技术（如Droplet-based microfluidics）：深入探讨其文库制备流程、捕获效率、背景噪音控制，以及如何应对高通量数据带来的计算挑战。重点分析该技术在血液学、免疫学和神经科学中鉴定稀有细胞亚群的实际应用案例。基于微孔板/引物捕获的系统：比较这些方法的优势，尤其是在需要高深度测序或特定基因集富集的场景下的表现。细胞质到核质的转录组学差异：讨论如何通过优化实验设计来区分细胞内不同区域的分子信息，而非仅仅停留在细胞水平的整体平均值。 2. 空间转录组学：将位置信息融入基因表达理解细胞如何相互作用，需要知道它们在哪里。本部分将作为连接分子信息与组织结构的桥梁：基于成像的测序方法（如MERFISH, seqFISH+）：详细介绍这些原位杂交技术的工作原理，它们如何实现对数千个转录本的同时、高空间分辨率检测。空间条形码技术（Spatial Barcoding）：分析诸如Slide-seq、Visium等基于空间矩阵的技术，探讨其在组织切片上重构基因表达图谱的流程，以及如何识别组织微环境（TME）中的功能区域。数据集成与可视化挑战：讨论如何将高维的单细胞数据与空间坐标数据进行整合，并介绍最新的三维重建和交互式可视化工具。 --- 第二部分：复杂基因组结构分析与长读长测序当前，对结构变异（SV）和重复序列区域的解析，要求测序技术能够跨越数千甚至数万碱基的距离。本部分将聚焦于长读长测序技术的崛起及其在解决复杂基因组学难题中的核心地位。 3. 纳米孔与光电长读长技术（PacBio HiFi与Oxford Nanopore）我们深入剖析两种主流长读长技术： PacBio HiFi（高保真）：探讨其如何通过循环连续读取（CCS）技术实现接近短读长的准确率，同时保持极长的读长，这对于解决重复序列和GC含量不均区域的组装至关重要。牛津纳米孔技术（ONT）：侧重于其实时测序能力、对DNA修饰的直接检测能力（如表观遗传学标记），以及在宏基因组和微生物组研究中的快速现场应用。 4. 结构变异的鉴定与影响长读长测序极大地提高了对复杂结构变异的检出能力： SV的分类与生物学意义：详细介绍缺失、重复、倒位、易位以及复杂的复合结构变异（CSVs），并讨论它们在癌症、遗传病中的致病机制。从数据到结构：介绍专门用于长读长数据的SV calling算法，如Manta、Sniffles等，并对比它们在准确性、召回率和假阳性率上的表现。基因组从头组装（De Novo Assembly）：讨论如何利用长读长数据构建高质量的参考基因组，特别是对于缺乏现有参考的物种或复杂的异染色质区域。 --- 第三部分：宏基因组学与环境基因组学的深度挖掘本书的第三部分将视角从单个生物体扩展到整个生态系统，探讨宏基因组学如何揭示微生物群落的功能潜力与动态变化。 5. 宏基因组学分析流程与挑战宏基因组学（Metagenomics）是理解环境、肠道和临床微生物组的关键工具：测序策略选择：比较全基因组宏基因组（WMS）与靶向16S rRNA测序的优缺点，并讨论如何利用宏转录组学（Metatranscriptomics）和宏蛋白质组学（Metaproteomics）来研究微生物的活性状态。功能注释与通路重建：详细介绍使用KEGG、COG、eggNOG等数据库进行功能分类的方法，并探讨如何从海量数据中重建复杂的微生物代谢通路。宿主-微生物组相互作用：探讨如何通过整合宿主基因组数据和微生物组数据，研究微生物群落如何影响宿主表型、药物代谢或疾病易感性。 6. 宏基因组组装与物种注释的精确化宏基因组数据组装的复杂性远超单一物种： MAGs（Metagenome-Assembled Genomes）的提取：深入探讨当前基于覆盖度和组成信息（如MaxBin, MetaBAT2）的MAGs组装流程，以及如何评估MAGs的完整性和污染度。单细胞基因组学（SAGs）的补充作用：比较MAGs与SAGs在解析培养组学稀有物种时的互补性。抗生素耐药基因（ARGs）的追踪与溯源：阐述使用CARD、ARG-ANNOT等数据库对耐药基因进行高精度注释的生物信息学流程，以及这些技术在公共卫生监测中的应用。 --- 第四部分：生物信息学基础与数据管理前沿基因组学的高通量特性对计算资源和分析流程提出了严苛要求。本部分将侧重于支撑所有这些技术的数据处理和分析方法。 7. 高效的数据处理与质量控制 NGS数据格式标准化与清洗：从FASTQ到BAM/CRAM的转换和压缩，以及如何使用Trimmomatic、FastQC等工具进行严格的质量控制。云计算与高性能计算（HPC）：讨论在AWS、Google Cloud或本地集群上部署和扩展基因组分析流程的最佳实践，包括使用Docker和Singularity容器化技术保证分析的可重复性。 8. 深度学习在基因组学中的应用潜力变异预测的革新：介绍深度卷积网络（CNN）和循环神经网络（RNN）如何应用于更准确地识别和分类短读长和长读长数据中的遗传变异。表观遗传学信号预测：讨论如何利用深度学习模型从原始测序信号（如Nanopore电流变化）中直接预测DNA甲基化或组蛋白修饰。本书内容结构紧凑，技术细节详尽，旨在为读者提供一个多维度、跨平台的技术视野，确保研究人员能够掌握当前基因组学领域最前沿的研究工具和分析策略，推动下一代生物医学和环境科学的突破。