A Practical Handbook of Preparative HPLC pdf epub mobi txt 电子书下载 2026

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出版者:Elsevier Science Ltd

作者:Wellings, Donald A.

出品人:

页数:176

译者:

出版时间:2005-10

价格:$ 127.69

装帧:HRD

isbn号码:9781856174664

丛书系列:

图书标签:

HPLC
Preparative HPLC
Chromatography
Analytical Chemistry
Purification
Laboratory Techniques
Chemical Engineering
Pharmaceutical Analysis
Biochemistry
Organic Chemistry

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具体描述

This book is a distillation of twenty years of practical experience of the high pressure liquid chromatography (HPLC) process. Deliberately steering clear of complex theoretical aspects, this book concentrates on the everyday problems associated with the technique, making it perfect for frequent use in the laboratory and for those in the pharmaceutical, agrochemical and biotechnology industries for the analysis and purification of drugs, small molecules, proteins and DNA. This book: provides practical, hands-on advice based on years of experience; will help ensure optimal design, equipment and separation results for your particular task; presents system layouts from laboratory to process scale; will help you to devise or improve record-keeping and documentation systems; provides practical, hands-on advice based on years of experience; will help ensure optimal design, equipment and separation results for your particular task; presents system layouts from laboratory to process scale; and, will help you to devise or improve record-keeping and documentation systems.

现代分离科学与色谱技术前沿：高分辨率液相色谱实践指南一本面向实践操作者的深度参考书，专注于解析高效液相色谱（HPLC）在复杂样品分离、方法开发与系统维护中的核心技术与最新进展。 --- 导言：超越基础，迈向高效分离的艺术与科学在分析化学和生物技术领域，高效液相色谱（HPLC）已成为不可或缺的核心工具。然而，从基础操作到解决复杂分离难题，中间存在着巨大的知识鸿沟。《现代分离科学与色谱技术前沿：高分辨率液相色谱实践指南》旨在填补这一空白，为寻求优化分离性能、提高分析效率和解决实际操作挑战的研究人员、分析化学家和技术人员提供一本详尽、深入且高度实用的参考手册。本书的编写宗旨在于提供一套完整的、基于工业标准和前沿研究成果的HPLC实践框架。我们避免冗长晦涩的理论堆砌，而是将重点放在“如何做”和“为什么这样做”的结合上，确保每一章节都能直接转化为实验室中的有效操作和改进措施。第一部分：色谱分离的底层逻辑与系统优化（约400字）本部分深入探讨了色谱分离的理论基础，但重点聚焦于如何将这些理论转化为可操作的参数控制。 1. 赋形剂与流动相的精确调控：详细阐述了不同类型溶剂（水、有机改性剂、缓冲盐）对分配系数、选择性和保留时间的协同影响。内容涵盖了离子强度、pH值梯度设计在反相、正相及离子交换色谱中的关键作用。特别关注了超临界流体色谱（SFC）作为绿色分离技术的快速兴起，并提供了其在极性化合物分离中的应用案例。 2. 柱床的结构与性能：系统分析了固定相颗粒的尺寸、孔径、表面化学修饰对分离效率（塔板数）和反压的影响。讨论了亚2微米技术（UHPLC）的物理化学原理，以及如何安全有效地操作高压系统，实现超快速分离。对于手性分离，深入解析了固定相手性选择剂的设计理念及其与目标分析物的相互作用机制。 3. 进样系统与检测器的集成优化：阐述了进样体积、线性度与分散效应之间的微妙平衡。重点介绍了多维色谱（2D-LC）的系统配置要求，包括串联接口设计和流速匹配，以应对复杂基质的“拥挤”色谱峰。此外，对光电二极管阵列（DAD）、质谱（MS）和电化学检测器（ECD）在特定应用中的性能限制与优化策略进行了详尽的对比分析。第二部分：方法开发与验证的系统化流程（约550字）本部分提供了从初步筛选到全面验证的、可复制的方法开发流程，是解决“如何快速找到最佳分离条件”的关键。 1. 梯度洗脱策略的设计与迭代：告别随机尝试。本书引入了一种基于“设计空间”的系统化梯度优化方法。首先基于初始筛选数据确定溶剂强度参数（$phi_0$ 和 $G$），然后利用响应面法（RSM）或D-最优设计（DoE）快速锁定最佳梯度斜率。针对复杂天然产物或蛋白质组学样品，提供了基于“选择性扫描”的预筛查技术。 2. 峰形与分离度问题的诊断与修正：详细列出了导致拖尾、分峰、肩峰等常见色谱问题的具体原因（从柱子污染到流动相不兼容）。提供了一套分步调试流程：首先检查系统健康状况，然后调整缓冲液和有机相比例，最后考虑柱温效应。对于难以分离的同分异构体，探讨了温度程序色谱和使用“无水”流动相的特殊技术。 3. 方法稳健性与验证：严格遵循国际药典和ICH指南，提供了进行方法验证的关键参数指标。重点解析了系统适用性测试（SST）的设计，包括对理论塔板数、分离度、重复性的严格要求。对于建立的分析方法，阐述了如何通过考察关键参数（如pH、温度、流速）的微小波动来评估方法的稳健性（Robustness Testing）。第三部分：高级应用：从生物分子到痕量分析（约450字）本部分将理论和方法开发知识应用于当前分析科学中最具挑战性的领域。 1. 亲水作用色谱（HILIC）的精细控制：鉴于HILIC在分析极性代谢物和多肽中的重要性，本书详细解析了水含量对面内迁移和选择性的决定性作用。提供了优化HILIC方法的关键参数集，包括盐浓度对抗荷载（loading capacity）的影响，以及如何利用高浓度缓冲液实现更锐利的峰形。 2. 蛋白质和多肽的分离策略：聚焦于反相HPLC在生物制药中的应用，包括单克隆抗体（mAb）的片段（如Fab, Fc）分析和糖基化谱的解析。详细介绍了尺寸排阻色谱（SEC）用于聚合物和蛋白聚集体分析的系统校准方法，以及如何利用表面等离子共振（SPR）检测器与HPLC联用的优势。 3. 痕量污染物与样品前处理的整合：强调了样品前处理（如固相萃取SPE）作为分离流程第一步的重要性。展示了如何通过优化SPE的选择性和洗脱条件，将HPLC系统的检测限（LOD）和定量限（LOQ）推向极致。特别关注了内标法的应用，以校正复杂的基质效应和进样误差，确保痕量分析的准确性。总结：面向未来的实践者《现代分离科学与色谱技术前沿：高分辨率液相色谱实践指南》不仅仅是一本技术手册，它是一份将现代分离科学转化为可靠、高效实验成果的路线图。通过对系统优化、方法构建和前沿应用的深入剖析，本书确保每一位使用者都能掌握在当前高要求分析环境中取得突破性成果所需的全部工具和洞察力。