分子生物实验参考手册（第2卷） pdf epub mobi txt 电子书下载 2026

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页数:168

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出版时间:2009-3

价格:32.00元

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isbn号码:9787122034533

丛书系列:

图书标签:

分子生物学
实验
参考书
生物技术
科研
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技术手册
生物化学
基因工程

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具体描述

《分子生物实验参考手册:基于数据试剂配制及其相关方法(第2卷)》是生物学及其相关学科的实验室案头必备手册，无论对于经验丰富的研究者还是初学者，都是非常有用的。我们希望，《分子生物实验参考手册:基于数据试剂配制及其相关方法(第2卷)》可帮助您在无法获得原始资料的情况下迅速获得必要的信息。若能置于案头，《分子生物实验参考手册:基于数据试剂配制及其相关方法(第2卷)》将是为您省时和排忧解难的重要资料之一。

分子生物学实验参考手册（第2卷）本手册旨在为分子生物学领域的科研人员、研究生以及技术人员提供一套全面、实用且深入的实验技术指南。本书内容聚焦于现代分子生物学研究中至关重要的各个方面，重点在于为研究者提供严谨的操作流程、详细的原理阐述以及常见问题的解决方案。卷一已经涵盖了分子生物学实验的基础部分，本卷（第2卷）则在此基础上，进一步拓展并深化了对复杂技术和前沿应用的探讨。我们的目标是使读者能够自信地掌握并灵活运用这些先进的技术，以应对日益复杂和精密的科研挑战。本书的核心内容包括但不限于以下几个关键领域：一、高级核酸操作与分析技术：基因组DNA和RNA的高质量提取与纯化：详细介绍针对不同样本类型（如全血、组织、细胞系、植物、微生物等）的优化提取方法，包括使用磁珠法、离心柱法等，并强调纯度、完整性以及产量评估的重要性。特别会探讨对RNA的降解敏感性以及如何有效避免。核酸定量与质控：深入讲解使用紫外-可见分光光度计、荧光定量仪（如Qubit、NanoDrop）进行定量分析的方法，并强调判断核酸质量（如A260/A280、A260/A230比值）的重要性。 PCR及其衍生技术：详细阐述实时荧光定量PCR（RT-qPCR）的原理、引物设计、反应条件优化、数据分析方法（如ΔΔCt法），以及其在基因表达定量、病原体检测等方面的应用。同时，会重点介绍数字PCR（dPCR）技术，解析其高精度定量能力，适用于稀有靶标检测、拷贝数变异分析等。核酸标记与杂交技术：涵盖放射性标记、荧光标记、生物素标记等多种标记方法，并详细介绍DNA/RNA探针的设计、合成及应用，如Southern Blotting、Northern Blotting的原理、步骤优化和结果解读。核酸文库构建与高通量测序（NGS）准备：深入讲解用于全基因组测序（WGS）、全外显子组测序（WES）、RNA测序（RNA-Seq）等多种NGS应用的DNA/RNA文库制备流程。这包括片段化、接头连接、PCR扩增、文库质控（如Agilent Bioanalyzer、Qubit）等关键步骤。特别会详细介绍不同NGS平台的文库构建策略差异，以及如何根据实验目的选择合适的文库类型（如单端/双端测序、UMI标签等）。二、蛋白质生物学实验方法：蛋白质提取与裂解：提供针对不同细胞类型（如哺乳动物细胞、细菌、酵母、植物组织）和不同亚细胞组分（如全细胞裂解、细胞质、细胞核、线粒体）的有效裂解方案，并讨论不同裂解缓冲液的成分和作用。蛋白质定量：详述BCA法、Bradford法等常用蛋白质定量方法的原理、步骤及注意事项，并讨论结果解读。 SDS-PAGE与Western Blotting：提供详细的SDS-PAGE电泳步骤，包括凝胶制备、样品加载、电泳条件优化，以及Western Blotting的膜转移、封闭、一抗二抗孵育、显色检测等全过程。会特别关注抗体选择、封闭条件优化、信号增强技术等，以提高检测的灵敏度和特异性。蛋白质纯化技术：介绍基于亲和层析、离子交换层析、疏水层析等原理的蛋白质纯化方法，并提供实际操作指南。蛋白质互作研究：重点介绍Co-immunoprecipitation (Co-IP) 和 Yeast Two-Hybrid (Y2H) 等经典和现代蛋白质互作研究技术。详细阐述Co-IP的抗体选择、实验条件优化、以及实验结果的验证。同时，也会探讨基于质谱的蛋白质互作分析（如AP-MS）的原理和应用。三、基因调控与表观遗传学研究： ChIP-Seq（Chromatin Immunoprecipitation Sequencing）：深入解析ChIP-Seq实验的设计、操作流程（从染色质免疫沉淀到DNA提取、文库构建、测序和数据分析）。详细介绍如何优化抗体选择、沉淀条件，以及针对不同目的（如转录因子结合位点、组蛋白修饰位点）的实验策略。 Bisulfite测序（BS-Seq）：详细介绍DNA甲基化检测的原理，包括亚硫酸氢盐处理、PCR扩增、测序（Sanger测序或NGS）及其数据分析方法。 ATAC-Seq（Assay for Transposase-Accessible Chromatin using sequencing）：介绍ATAC-Seq技术，阐述其检测开放染色质区域的原理，以及在基因组可及性、转录因子结合位点预测等方面的应用。四、细胞生物学与分子生物学结合的技术：细胞培养与转染/转导：提供各种类型细胞（原代细胞、细胞系、干细胞）的培养方法，以及瞬时转染、稳定转染、病毒转导等技术。会详细讨论不同转染试剂的选择、优化转染效率的策略，以及无菌操作的重要性。细胞成像与荧光标记技术：介绍免疫荧光染色、荧光蛋白标记（如GFP, RFP）在细胞内定位分析中的应用。会涵盖共聚焦显微镜、荧光显微镜的使用和图像分析。 CRISPR/Cas9基因编辑技术：详细介绍CRISPR/Cas9系统的原理、sgRNA设计、递送方法（如转染、电穿孔、病毒载体），以及基因敲除、敲入、点突变等应用。会重点讲解如何设计和验证基因编辑效果。五、生物信息学基础与数据分析入门：基因序列数据库（NCBI, Ensembl等）的使用：介绍如何检索、下载和分析基因、蛋白质序列信息。常用分子生物学软件介绍：如Primer3（引物设计）、BLAST（序列比对）、MEGA（进化树构建）等。 NGS数据初步分析：简要介绍NGS原始数据（FASTQ格式）的质控，以及基础的比对（如Bowtie2, BWA）、变异检测（如GATK）和基因表达定量（如HTSeq-count, RSEM）等概念。本书的最大特色在于，我们不仅提供了详细的操作步骤，更注重对每个实验原理的深入剖析，以及对可能遇到的技术瓶颈和干扰因素的预判与规避。每一章节都力求清晰、准确、易于理解，并通过大量图示和流程图来辅助说明。此外，书中还穿插了大量的实验技巧、优化建议和案例分析，旨在帮助读者快速掌握实验精髓，提高实验成功率，并能独立解决实际科研问题。本书的读者对象为：从事分子生物学、遗传学、生物化学、细胞生物学、医学、农学等相关领域的研究人员。在读博士、硕士研究生。从事分子生物学技术服务的技术人员。我们相信，本书将成为您在分子生物学研究道路上不可或缺的得力助手。

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目录信息

读后感

评分☆☆☆☆☆

用户评价

评分☆☆☆☆☆

坦白说，我一开始对这套“参考手册”的期望值是比较保守的，毕竟市面上同类书籍汗牛充栋，能真正做到“参考价值”大于“理论堆砌”的并不多。然而，当我深入研读其中关于基因编辑技术应用的章节时，我被其详尽和前瞻性深深折服了。它没有停留在教科书级别的基础介绍，而是深入剖析了最新一代CRISPR系统的优化策略、脱靶效应的最小化手段，甚至还包含了如何结合单细胞测序技术来验证基因编辑成功率的实操流程。这种深度，意味着作者团队绝对是一线研究人员，他们分享的不是纸上谈兵的理论，而是无数次失败和成功经验凝练出的“坑点预警”和“最佳实践”。对于我这种需要快速将前沿技术落地到实际项目中的研究人员来说，这本书提供的不仅仅是方法，更是一种战略性的指导。

评分☆☆☆☆☆

这本书的叙事风格，简直就像是一位经验老到的导师，耐心且极其严谨地牵引着你进入复杂的实验迷宫。它的文字表达非常克制，没有太多华丽的辞藻，每一个句子都直击核心，每一个步骤的描述都如同精确校准的移液器一般精准无误。我特别喜欢它在关键步骤前设置的“注意事项”和“潜在风险提示”模块，这些小小的方框里往往蕴含着只有经历过无数次失败的人才能总结出的经验教训。例如，在处理某些敏感的核酸提取步骤时，作者用一种近乎是耳提面命的口吻提醒了缓冲液的温度控制对下游酶活性的影响，这种细致入微的关怀，极大地降低了初学者“踩雷”的几率，也让我这位资深实验者在面对新体系时感到安心不少。

评分☆☆☆☆☆

这本《分子生物实验参考手册（第2卷）》的装帧设计和印刷质量绝对是顶级的享受。书页的纸张厚实，拿在手里沉甸甸的，有一种专业书籍的可靠感。封面设计简约而不失大气，图文排版清晰合理，即使是如此复杂的专业内容，阅读起来也不会感到视觉疲劳。我尤其欣赏它在细节处理上的用心，比如目录的索引做得非常细致，需要查找特定实验步骤时，能迅速定位，这对于高强度的实验工作来说，简直是效率的保证。它显然不是那种仓促出版的“应付之作”，而是经过了精心打磨和反复校对的成果。光是看着它摆在书架上，就让人对接下来的学习和实验充满信心，仿佛拥有了一把开启精密科学大门的钥匙。这种对物理实体的尊重，在如今电子阅读盛行的时代，显得尤为珍贵，它带来的翻阅触感和权威感是任何屏幕都无法替代的。

评分☆☆☆☆☆

要评价这本手册的适用范围，我认为它完美地搭建了一座连接基础理论与高阶实践的桥梁。它并没有将读者视为完全的新手，而是默认读者已经掌握了分子生物学的基本功，比如DNA/RNA的提取、PCR的原理等。因此，第二卷的重点非常明确地放在了那些需要更高精密度和更复杂仪器支持的实验模块上，比如高通量测序文库的构建优化、蛋白质互作的体内外验证技术（如Y2H的高级应用与局限性分析），以及某些复杂病毒载体的包装与滴度测定。它不是一本让你从零开始的入门教材，而是一本让你从“会做”迈向“做精”、“做完美”的必备“内功心法”。对于研究生或者博士后而言，它能帮你迅速提升实验设计的成熟度。

评分☆☆☆☆☆

从实用性的角度来看，这本书的价值评估体系与市面上大多数书籍是不同的。它不是那种翻一两遍就能束之高阁的读物，而是那种需要常年放在实验台触手可及的地方，时不时地去查阅和对比的“工作工具”。我发现我不再需要频繁地在各种在线论坛和期刊的补充材料中零散地搜索那些关键的参数范围或试剂配比了。这本书将这些分散的、往往难以获取的“黄金数据”系统地整合在了一起，形成了极强的可复现性保障。这种集成化的、高度实用的信息整合能力，是它最大的价值所在，意味着它直接缩短了我的实验周期，帮助我更快地获得可靠的数据，这对于任何追求效率的科研工作者来说，都是无价的资源。

评分☆☆☆☆☆